キシラジン
C12H16N2S 220.34
4H-1,3-チアジン-2-アミン、N-(2,6-ジメチルフェニル)-5,6-ジヒドロ-。
5,6-ジヒドロ-2-(2,6-キシリジノ)-4H-1,3-チアジン [7361-61-7]。
» キシラジンには、98.0 パーセント以上 102.0 パーセント以下の C12H16N2S が含まれています。
梱包と保管-密閉容器に保管してください。 25 時に保管し、15 時から 30 時の間は外出が許可されます。
ラベル表示-獣医学での使用のみを目的としている場合は、ラベルにその旨が記載されています。
USP 参照規格<11>
USP キシラジン RS
識別-
A: 赤外線吸収<197K>。
B: 紫外線吸収率<197U>-
溶液: 1 mL あたり 5 μg。
媒体: 0.1 N 塩酸。
C: 薄層クロマトグラフィー同定試験<201>-
試験溶液: 2 mg/mL、クロロホルム中。
展開溶媒系: アセトン、クロロホルム、メタノール (2:1:1)。
手順-試験溶液および標準溶液を塗布する前に、プレートを 105 で 30 分間以上乾燥させ、デシケーター内で冷却します。温風を当ててアプリケーションを乾燥させ、現像します。短波長ＵＶ光下で検査する：試験溶液から得られる主スポットのサイズ、強度、およびＲＦ値は、標準溶液から得られる主スポットのそれらに一致する。
融解範囲<741>: 136 ～ 142。
乾燥減量<731>-真空中で60℃で4時間乾燥させます。重量の減少は0.5%以下です。
強熱残留物＜２８１＞：０．１％以下。
重金属、方法 II<231>: 1 g あたり 20 μg。
3-アミノ-1-プロパノール-の制限超音波処理を使用して溶解を達成するために、1 mL あたり 100 mg を含むメタノール中のキシラジンの試験溶液を調製します。 1 mL あたり 0.5 mg を含む 3-アミノ-1-プロパノールのメタノール標準溶液を調製します。試験溶液と標準溶液の５μＬを、０．２５ｍｍ層のクロマトグラフィー用シリカゲルでコーティングされた薄層クロマトグラフィープレート（Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ＜６２１＞を参照）に別々に塗布する。塗布物を乾燥させ、アルコールと水酸化アンモニウム（80:20）の混合物からなる溶媒系を含む飽和クロマトグラフィーチャンバー内で、溶媒フロントがプレートの長さの約 4 分の 3 に移動するまでクロマトグラムを展開します。プレートをクロマトグラフィーチャンバーから取り出し、溶媒の前面にマークを付け、プレートを空気乾燥させます。プレートにニンヒドリンのアルコール溶液 (500 分の 1) をスプレーし、直ちにプレートを 105 ℃のオーブンで加熱します。斑点が見えたら、オーブンからプレートを取り出し、冷まします。クロマトグラムを調べ、3-アミノ-1-プロパノールに対応するスポットの強度を比較します。試験溶液から得られた 3-アミノ-1-プロパノールのスポットの強度は、標準溶液 (0.5%) から得られた 3-アミノ-1-プロパノールのスポットの強度より大きくありません。
アセトンとイソプロピルアルコールの制限-
希釈剤-氷酢酸 15 mL を水で希釈して 1000 mL にし、混合します。
標準溶液-アセトンとイソプロピル アルコールのそれぞれ 10.0 μL を 500 mL のメスフラスコに移し、希釈剤で所定の容量まで希釈し、混合します。この溶液には、1 mL あたり 15.8 μg のアセトンと 1 mL あたり 15.7 μg のイソプロピルアルコールが含まれています。
試験溶液-正確に秤量した約 100 mg のキシラジンを 10 mL メスフラスコに移し、希釈剤に溶解して定容まで希釈し、混合します。
クロマトグラフィー システム (クロマトグラフィー<621> を参照)-ガスクロマトグラフは、イオン化検出器と、８０℃に０．１％相Ｇ２５を充填した２ｍｍ×１．８ｍのカラムを備えている。 100まで-メッシュサポートS7。ヘリウムは毎分約 30 mL の流量でキャリアガスとして使用されます。注入ポートと検出器の温度は、それぞれ約 240 ℃と 275 ℃に維持されます。システムは次の手順に従ってプログラムされます。各注入後、カラム温度を 6 分間 30 ℃に維持し、その後、1 分あたり 10 の速度で 100 まで上昇させ、さらに 1 分あたり 15 の速度で 220 まで上昇させ、10 分間維持します。標準溶液をクロマトグラフし、手順の指示に従ってピーク応答を記録します。相対保持時間は、アセトンでは約 0.75、イソプロピル アルコールでは 1.0 です。アセトンとイソプロピルアルコール間の分離度 R は 2.0 以上です。各分析物のピークから決定されるテーリングファクターは 2.0 以下です。反復注入の相対標準偏差は 2.0% 以下です。
手順-標準液と試験液を等量（約 2 μL）ずつクロマトグラフに注入し、クロマトグラムを記録し、主要ピークの面積を測定します。キシラジン部分に含まれるアセトンとイソプロピル アルコールの割合を次の式で計算します。
(C/W)(rU / rS)
ここで、C は、標準溶液の各 mL 中のアセトンまたはイソプロピル アルコールの濃度 (μg/mL) です。 W は、試験溶液を調製するために採取されたキシラジンの重量 (mg) です。 rU と rS は、それぞれ試験溶液と標準溶液から得られた関連分析物ピークの応答です。0.02% 以下のアセトンと 0.2% 以下のイソプロピル アルコールが検出されます。
クロマトグラフィー純度-
溶液 A、溶液 B、移動相、および希釈剤-アッセイの指示に従って進めてください。
標準溶液-アッセイで調製した標準調製物の正確に測定した体積を希釈剤で定量的に希釈し、1 mL あたり 0.008 mg の USP キシラジン RS の濃度を有する溶液を取得します。
試験溶液-正確に秤量した約 100 mg のキシラジンを 10 mL メスフラスコに移し、5.0 mL の溶液 B を加え、かき混ぜて溶解します。溶液 A を約 4 mL 加え、かき混ぜます。溶液 A で定容まで希釈し、混合します。
クロマトグラフィー システム (クロマトグラフィー<621> を参照)-液体クロマトグラフには、205nm の検出器と、充填物 L7 およびガードカラムを含む 4.6-mm × 25-cm のカラムが装備されています。流量は毎分約 1 mL です。 75% 溶液 A と 25% 溶液 B からなる移動相でカラムを平衡化します。各注入後、この組成を 8 分間維持し、その後、溶液 B の割合を 27 分間かけて 25% から 70% まで直線的に増加させ、その組成で 5 分間維持します。次に、次の注入の前に、溶液 A の割合を 75% まで急速に増やします。標準溶液をクロマトグラフし、手順の指示に従ってピーク応答を記録します。テーリングファクターは 1.5 以下です。反復注入の相対標準偏差は 5.0% 以下です。
手順-標準溶液と試験溶液を等量（約 10 μL）ずつクロマトグラフに注入し、クロマトグラムを記録し、主要ピークの面積を測定します。次の式でキシラジン中の各不純物の割合を計算します。
1000(C/W)(ri F/rs)
ここで、C は標準溶液中の USP キシラジン RS の濃度 (mg/mL) です。 W は、試験溶液を調製するために採取されたキシラジンの重量 (mg) です。 ri は、希釈剤のクロマトグラムには存在しない、試験溶液のクロマトグラムにおける個々の不純物ピークの応答です。 Fは、キシラジンの保持時間に対して約0.8の応答時間での2,6-ジメチルアニリンピークの応答係数0.72、約1.3の相対保持時間での不純物の応答係数0.36、約2の相対保持時間での2,6-ジメチルフェニルイソチオシアネートの応答係数0.37、およびその他の不純物の応答係数は1.0であり、 rS は、標準溶液のクロマトグラムにおけるキシラジン ピークの応答です。個々の不純物は 0.5% 以下しか検出されません。検出されたすべての不純物の合計は 1% 以下です。
アッセイ-
ソリューション A- 1-ヘプタンスルホン酸ナトリウム 3.03 g を水 800 mL に溶解し、2 N 硫酸で pH 3.0 に調整し、水で 1000 mL に希釈し、混合します。 0.5-μm以上の微細孔を持つフィルターを通過させます。
ソリューション B-アセトニトリルを使用してください。
移動相-クロマトグラフィー システムの指示に従って、溶液 A と溶液 B のさまざまな混合物を使用します。
希釈剤-溶液 A と溶液 B の混合物 (50:50) を調製します。
標準的な準備-既知濃度約 0.4 mg/mL の USP キシラジン RS の希釈剤溶液を調製します。
アッセイの準備-正確に秤量した約 10 mg のキシラジンを 25 mL メスフラスコに移し、希釈剤で定容まで希釈し、混合します。
クロマトグラフィー システム (クロマトグラフィー<621> を参照)-液体クロマトグラフには、226nm 検出器と充填物 L1 を含む 3.9-mm × 30-cm のカラムが装備されています。流量は毎分約 1 mL です。 70% 溶液 A と 30% 溶液 B からなる移動相でカラムを平衡化します。各注入後、この組成を 5 分間維持し、その後、溶液 B の割合を 5 分間かけて 30% から 40% まで直線的に増加させ、その組成で 5 分間維持します。次に、次の注入の前に、溶液 A の割合を 70% まで急速に増やします。標準調製物をクロマトグラフし、手順の指示に従ってピーク応答を記録します。テーリングファクターは 2.0 以下です。反復注入の相対標準偏差は 2.0% 以下です。
手順-等量（約 10 μL）の標準調製物とアッセイ調製物を別々にクロマトグラフに注入し、クロマトグラムを記録し、主要ピークの面積を測定します。次の式でキシラジン部分に含まれる C12H16N2S の量を mg 単位で計算します。
25℃(rU / rS)
ここで、C は標準製剤中の USP キシラジン RS の濃度 (mg/mL) です。 rU と rS は、それぞれアッセイ調製物と標準調製物から得られたキシラジンのピーク応答です。