ウルソデオキシコール酸
C24H40O4 Mr 392.6 [128-13-2]
定義
3α,7β-ジヒドロキシ-5β-コラン-24-油酸。
含有量：99.0パーセント～101.0パーセント（乾燥物）。
登場人物
外観：白色またはほぼ白色の粉末。
溶解度: 水に実質的に不溶、エタノール (96%) に易溶、アセトンにわずかに可溶、塩化メチレンに実質的に不溶。
融点：約202℃。
識別
最初の識別: A.
2 番目の識別: B、C。
A. 赤外吸収分光光度法 (2.2.24)。
比較: ウルソデオキシコール酸 CRS。
B. 不純物 C のテストで得られたクロマトグラムを調べます。
結果: 試験溶液 (b) で得られたクロマトグラムの主スポットは、参照溶液 (a) で得られたクロマトグラムの主スポットと位置、色、サイズが類似しています。
C. 約 10 mg を 1 mL の硫酸 R に溶解します。0.1 mL のホルムアルデヒド溶液 R を加え、5 分間放置します。 ５ｍＬの水Ｒを加える。得られた懸濁液は緑色がかった。
テスト
比旋光度（2.2.7）：+58.0～+62.0（乾燥物）。
０．５００ｇを無水エタノールＲに溶解し、同溶媒で２５．０ｍＬに希釈する。
不純物Ｃ。薄層クロマトグラフィー（２．２．２７）。
溶媒混合物: 水 R、アセトン R (10:90 V/V)。
試験溶液(a)。試験物質 0.40 g を混合溶媒に溶解し、混合溶媒で 10 mL に希釈します。
試験溶液(b)。試験溶液(a) 1 mL を混合溶媒で 10 mL に希釈する。
参照溶液 (a)。 40 mg のウルソデオキシコール酸 CRS を溶媒混合物に溶解し、溶媒混合物で 10 mL に希釈します。
参照溶液 (b)。 20 mg のリトコール酸 CRS (不純物 C) を溶媒混合物に溶解し、溶媒混合物で 10.0 mL に希釈します (溶液 A)。この溶液 2.0 mL を混合溶媒で 100.0 mL に希釈します。
参照溶液 (c)。溶液 A 5 mL にケノデオキシコール酸 CRS (不純物 A) 10 mg を加え、溶媒混合物で 50 mL に希釈します。
プレート：TLCシリカゲルプレートR.
移動相: 氷酢酸 R、アセトン R、メチレン 塩化物 R (1:30:60 V/V/V)。
塗布量：5μL。
展開: プレートの 2/3 以上。
乾燥：120℃ 10分
検出: 1 倍量の硫酸 R と 20 倍量の氷酢酸 R の混合物中のリンモリブデン酸 R の 47.6 g/L 溶液を直ちにスプレーし、明るい背景に青いスポットが現れるまで 120℃ で加熱します。
システム適合性: 参照溶液 (c):
-クロマトグラムには、明確に分離された 2 つの主要スポットが示されています。
限界: 試験溶液 (a):
-不純物 C: 不純物 C によるスポットは、参照溶液 (b) で得られたクロマトグラムの主要なスポット (0.1 パーセント) よりも強くありません。
関連物質。液体クロマトグラフィー(2.2.29)。
溶媒混合物: メタノール R、移動相 (10:90 V/V)。
テスト溶液。試験物質 60 mg を混合溶媒に溶解し、混合溶媒で 20.0 mL に希釈します。
参照溶液 (a)。システム適合性 CRS 用のウルソデオキシコール酸バイアル (不純物 A および H を含む) の内容物を 1.0 mL の溶媒混合物に溶解します。
参照溶液 (b)。試験溶液 1.0 mL を混合溶媒で 100.0 mL に希釈する。この溶液 1.0 mL を混合溶媒で 10.0 mL に希釈します。
コラム:
-サイズ: 長さ = 0.25 m、直径 = 4.6 mm。
-固定相:エンドキャップされたオクタデシルシリルシリカゲル クロマトグラフィーＲ（５μｍ）；
-温度：40℃±1℃。
移動相: 30 容量のアセトニトリル R、リン酸 R で pH 3 に調整した 0.78 g/L リン酸二水素ナトリウム溶液 R の 37 容量、および 40 容量のメタノール R を混合します。
流量: 0.8 mL/分。
検出：屈折計、35±1℃。
注入量：150μL。
実行時間: ウルソデオキシコール酸の保持時間の 4 倍。
不純物の同定: システム適合性 CRS 用のウルソデオキシコール酸に付属のクロマトグラムと、参照溶液 (a) で得られたクロマトグラムを使用して、不純物 A および H によるピークを特定します。
ウルソデオキシコール酸を基準とした相対保持率 (保持時間 = 約 14 分): 不純物 H = 約 0.9。不純物Ａ＝約２．８。
システム適合性: 参照溶液 (a):
-分解能: 不純物 H とウルソデオキシコール酸によるピーク間最小 1.5。
制限:
-不純物Ａ：基準溶液（ｂ）で得られたクロマトグラムの主ピークの面積の１０倍以下（１．０パーセント）。
-不特定の不純物: 各不純物について、参照溶液 (b) で得られたクロマトグラムの主ピークの面積 (0.10 パーセント) 以下。
-合計: 参照溶液 (b) で得られたクロマトグラムの主ピークの面積の 15 倍以下 (1.5 パーセント)。
-無視限界: 参照溶液 (b) で得られたクロマトグラムの主ピークの面積の 0.5 倍 (0.05 パーセント)。
重金属 (2.4.8): 最大 20 ppm。
1.0 g は試験 C に準拠します。鉛標準液 (10 ppm Pb) R 2 mL を使用して基準溶液を調製します。
乾燥減量 (2.2.32): 最大 1.0 パーセント、105℃ のオーブンで乾燥することにより 1.000 g で測定。
硫酸灰分 (2.4.14): 最大 0.1 パーセント、1.0 g で測定。
アッセイ
0.350 g を 50 mL のエタノール (96 パーセント) R に溶解し、あらかじめ 0.2 mL のフェノールフタレイン溶液 R に中和します。50 mL の水 R を加え、ピンク色が得られるまで 0.1 M 水酸化ナトリウムで滴定します。
1 mL の 0.1 M 水酸化ナトリウムは 39.26 mg の C24H40O4 に相当します。
不純物
特定不純物：A、C。
その他の検出可能な不純物（以下の物質は、十分なレベルで存在する場合、モノグラフのいずれかの試験によって検出されます。これらは、その他の不特定の不純物に関する一般許容基準および/または一般モノグラフの医薬品用途物質（2034）によって制限されます。したがって、適合性を実証するためにこれらの不純物を特定する必要はありません。5.10 も参照。
医薬用物質中の不純物の管理）：B、D、E、F、G、H、I.
A. 3α,7α-ジヒドロキシ-5β-コラン-24-油酸（ケノデオキシコール酸）、
B. 3α,7α,12α-トリヒドロキシ-5β-コラン-24-油酸（コール酸）、
C. 3α-ヒドロキシ-5β-コラン-24-油酸（リトコール酸）、
D. 3α,7β,12α-トリヒドロキシ-5β-コラン-24-油酸（ウルソコール酸）、
E. 3α,12α-ジヒドロキシ-5β-コラン-24-油酸（デオキシコール酸）、
F. 3α-ヒドロキシ-7-オキソ-5β-コラン-24-油酸、
G. メチル 3α,7β-ジヒドロキシ-5β-コラン-24-オートエート、
H. 3β,7β-ジヒドロキシ-5β-コラン-24-油酸、
I. 5β-コラン-3α,7β,24-トリオール。