オルリファスト
C29H53NO5 495.73
1-ロイシン、N-ホルミル-、1-[(3-ヘキシル-4-オキソ-2-オキセタニル)メチル]ドデシルエステル、[2S-[2(R*), 3]]-;
N-ホルミル-l-ロイシン、(3S,4S)-3-ヘキシル-4-[(2S)-2-ヒドロキシトリデシル]-2-オキセタノンとのエステル [96829-58-2]。
定義
オーリスタットは、無水、無溶媒ベースで計算して、NLT 98.0%およびNMT 101.5%のC29H53NO5を含有する。
識別
• A. 赤外線吸収<197M>
• B. サンプル溶液の主要ピークの保持時間は、アッセイで得られた標準溶液の保持時間に対応します。
アッセイ
• 手順
[注-この分析では、溶液の調製または封じ込めにプラスチック製フラスコの使用を避けてください。 ]
移動相：アセトニトリル、リン酸、水（860：0.05：140）
標準溶液: 移動相中の USP Orlistat RS 0.5 mg/mL。調製後すぐに注入するか、5 で保管してください。
サンプル溶液: 移動相中の 0.5 mg/mL のオルリスタット。調製後すぐに注入するか、5 で保管してください。
クロマトグラフシステム
(クロマトグラフィー<621>、システムの適合性を参照。)
モード: LC
検出器: UV 195
カラム: 3.9-mm × 15-cm; 4-µm パッキング L1
流量: 1.0 mL/分
注入サイズ: 20 μL
システム適合性
サンプル：標準液
適合性要件
相対標準偏差: NMT 2.0%
分析
サンプル：標準液とサンプル液
摂取したオルリスタットの一部に占めるオルリスタット (C29H53NO5) の割合を計算します。
結果 = (rU/rs) × (CS/CU) × 100
rU = サンプル溶液からのピーク応答
rS = 標準溶液からのピーク応答
CS = 標準溶液中の USP オルリスタット RS の濃度 (mg/mL)
CU = サンプル溶液中のオルリスタットの濃度 (mg/mL)
合格基準: 無水、無溶剤ベースで 98.0%-101.5%
不純物
無機不純物
• 強熱残留物<281>: NMT 0.1%
• 重金属、メソッド II<231>: 20 ppm
有機不純物
• 手順 1: オルリスタット関連化合物 A の制限
標準溶液: アセトン中の USP Orlistat 関連化合物 A RS 0.1 mg/mL
サンプル溶液: 50 mg/mL のオルリスタットのアセトン溶液
クロマトグラフシステム
(クロマトグラフィー<621>、薄層クロマトグラフィーを参照。)
モード: TLC
吸着剤: クロマトグラフィー用シリカゲル混合物の 0.25-mm 層
塗布量：10μL
展開溶媒系: トルエンおよび酢酸エチル (4:1)
検出溶液：２．５ｇのリンモリブデン酸と１ｇの硫酸第二鉄を１００ｍＬのメスフラスコに移し、メタノールに溶解し、メタノールで定容する。
分析
サンプル：標準液とサンプル液
プレートを取り外し、十分に乾燥させます。乾燥したプレートに検出溶液をスプレーし、プレートを 120 のオーブンに 30 分間置きます。
合格基準: オルリスタット関連化合物 A に対応するサンプル溶液からの二次スポットは、標準溶液からの対応するスポット (0.2%) よりも強くありません。
• 手順 2: オルリスタット関連化合物 B の制限
標準溶液: 塩化メチレン中の USP Orlistat 関連化合物 B RS 0.025 mg/mL
サンプル溶液: 塩化メチレン中の 50 mg/mL のオルリスタット
スパイクされたサンプル溶液: 標準溶液中の 50 mg/mL のオルリスタット
クロマトグラフシステム
(クロマトグラフィー<621>、システムの適合性を参照。)
モード: GC
検出器: 炎イオン化
カラム: 0.32-mm x 30-m 溶融シリカ、0.25-µm G27 固定相でコーティング
カラム温度: 以下の温度プログラム表を参照してください。
初期温度 () 温度上昇 (/分) 最終温度 () 最終温度での保持時間 (分)
50 4 170 -
170 30 300 30
温度
インジェクター：270
検出器: 280
キャリアガス：ヘリウム
流量: 30 mL/分
スプリット比: 10:1
注入サイズ: 2 μL
システム適合性
サンプル：標準液
適合性要件
相対標準偏差: NMT 10.0%
分析
サンプル: サンプル溶液およびスパイクサンプル溶液
摂取したオルリスタットの一部に含まれるオルリスタット関連化合物 B の割合を計算します。
結果 = [rU/(rSP rU)] × (CS/CT) × 100
rU = サンプル溶液からのオルリスタット関連化合物 B のピーク応答
rSP = スパイクされたサンプル溶液からのオルリスタット関連化合物 B のピーク応答
CS = 標準溶液中の USP オルリスタット関連化合物 B RS の濃度 (mg/mL)
CT = スパイクされたサンプル溶液中のオルリスタットの濃度 (mg/mL)
合格基準: NMT 0.05% のオルリスタット関連化合物 B が検出されました。
• 手順 3
[注-この分析では、溶液の調製または封じ込めにプラスチック製フラスコの使用を避けてください。 ]
移動相、標準溶液、サンプル溶液: アッセイの指示に従って調製します。
システム適合性溶液: 移動相中の USP Orlistat RS 10 μg/mL、USP Orlistat 関連化合物 C RS 0.1 μg/mL、および USP Orlistat 関連化合物 D RS 0.25 μg/mL
クロマトグラフシステム
(クロマトグラフィー<621>、システムの適合性を参照。)
システム適合性溶液のクロマトグラフィーを除いて、アッセイの指示に従って進めます。
システム適合性
サンプル: システム適合性ソリューション
適合性要件
信号対ノイズ比: オルリスタット関連化合物 C およびオルリスタット関連化合物 D ピークの NLT 3
相対標準偏差: オルリスタット ピークの NMT 10.0%
分析
サンプル：標準液とサンプル液
採取されたオルリスタットの部分に含まれる各不純物の割合を計算します。
結果 = (rU/rs) × (CS/CU) × (1/F) × 100
rU = サンプル溶液からの個々の不純物のピーク応答
rS = 標準溶液からの USP Orlistat RS のピーク応答
CS = 標準溶液中の USP オルリスタット RS の濃度 (mg/mL)
CU = サンプル溶液中のオルリスタットの濃度 (mg/mL)
F = 不純物表 1 に示す相対応答係数
合格基準: 不純物表 1 を参照してください。
不純物表1
名前 相対保持時間 相対応答係数 合格基準、NMT (%)
ホルミルロイシネア 0.10 4.0 0.2
オルリスタット関連化合物 C 0.13 33 0.05
オルリファスト オープン リング エピマーブ 0.44 1.0 0.2
オルリファスト関連化合物 D* 0.90 -で計算
手順4
オルリスタット開環アミデック* 0.90 -で計算
手順4
オルリファスト 1.00 - -
d-ロイシンオルリスタット 1.18 1.0 0.2
個々の未確認の不純物 - 1.0 0.1
* この LC システム内の共溶出物は、手順 4 を使用して決定されます。
N-ホルミル-l-ロイシン。
b (2S,3R,5S)-5-[(S)-2-ホルミルアミノ-4-メチル-ペンタノイルオキシ]-2-ヘキシル-3-ヒドロキシ-ヘキサデカン酸。
c N-ホルミル-l-ロイシン(S)-1-[(2S,3S)-2-ヒドロキシ-3-[1-フェニル-R-エチルカルボモイル]ノニル]-ドデシルエステル。
d N-ホルミル-d-ロイシン(S)-1-[[(2S,3S)-3-ヘキシル-4-オキソ-2-オキセタニル]メチル]ドデシルエステルまたはエナンチオマー。
• 手順 4: オルリスタット関連化合物 D の制限
移動相: メタノールと水 (83:17)
システム適合性溶液: アセトニトリル中の USP Orlistat RS 4 mg/mL および USP Orlistat 関連化合物 D RS 2.4 μg/mL それぞれ
標準溶液: アセトニトリル中の USP Orlistat RS 5.0 mg/mL
サンプル溶液: アセトニトリル中の 5.0 mg/mL オルリスタット
クロマトグラフシステム
(クロマトグラフィー 621、システムの適合性を参照。)
モード: LC
検出器：205nm
カラム: 4.0-mm × 25-cm; 5-µm パッキング L7
流量: 0.6 mL/分
注入サイズ: 20 μL
システム適合性
サンプル: システム適合性ソリューション
適合性要件
信号対雑音比: オルリスタット関連化合物 D ピークの NLT 3
相対標準偏差: オルリスタット ピークの NMT 10.0%
分析
サンプル：標準液とサンプル液
採取されたオルリスタットの部分に含まれる各不純物の割合を計算します。
結果 = (rU/rs) × (CS/CU) × (1/F) × 100
rU = サンプル溶液からの個々の不純物のピーク応答
rS = 標準溶液からの USP Orlistat RS のピーク応答
CS = 標準溶液中の USP Orlistat RS の濃度 (μg/mL)
CU = サンプル溶液中のオルリスタットの濃度 (μg/mL)
F = 不純物表 2 で得られる相対応答係数
合格基準: 不純物表 2 を参照してください。
不純物表2
名前 相対保持時間 相対応答係数 合格基準、NMT (%)
オルリスタット関連化合物 D 0.94 1.0 0.2
オルリファスト 1.00 - -
オルリスタット開環アミデア 1.25 4.3 0.1
N-ホルミル-l-ロイシン(S)-1-[(2S,3S)-2-ヒドロキシ-3-[1-フェニル-R-エチルカルボモイル]ノニル]-ドデシルエステル。
• 手順 5: オルリスタット関連化合物 E の制限
緩衝液: 0.4 N ホウ酸溶液、pH 10.2 に調整
誘導体化剤: o-フトアルデヒド (OPA) 溶液。 [注-商業的に入手できない場合、誘導体化剤は、0.4 M ホウ酸緩衝液中の 3-メルカプトプロピオン酸およびオフタルジアルデヒドのそれぞれ 1% として調製できます。
溶液 A: 4.1 g の酢酸ナトリウム三水和物および 40 mg のエチレンジアミン四酢酸 (EDTA) を 1 L メスフラスコに移します。水９５０ｍＬに溶解し、０．１Ｎ水酸化ナトリウムでｐＨ７．２に調整する。水で定容まで希釈し、テトラヒドロフラン 2.5 mL を加えて混合します。濾過し、脱気します。
溶液 B: 2.7 g の酢酸ナトリウム三水和物および 40 mg の EDTA を 1 L メスフラスコに移します。水２００ｍＬに溶解し、０．１Ｎ水酸化ナトリウムでｐＨ７．２に調整する。 800 mL のアセトニトリルを加え、濾過し、脱気します。
移動相: 以下のグラジエント表を参照してください。
時間 (分) 溶液 A (%) 溶液 B (%)
0 96.7 3.3
20 60 40
24 0 100
38 0 100
38 96.7 3.3
45 96.7 3.3
標準溶液：秤量した約0.2 mgのUSPオルリスタット関連化合物E RSを20 mLのヘッドスペースバイアルに移す。 4 N 水酸化ナトリウム 10 mL を加え、バイアルを閉じます。バイアルを 100 ℃で 1 時間加熱し、室温まで放冷します。得られた溶液 2 mL を 50 mL メスフラスコに移し、水で定容まで希釈します。この溶液 0.5 mL に、緩衝液 2.0 mL と誘導体化剤 0.5 mL を加えます。
サンプル溶液: 標準溶液の指示どおりに進めますが、代わりに 0.2 mg の USP オルリスタット関連化合物 E RS の代わりに 25 mg のオルリスタットを使用します。
クロマトグラフシステム
(クロマトグラフィー<621>、システムの適合性を参照。)
モード: LC
検出器: 蛍光 340 nm (励起)。 450nm（発光）
コラム
ガード: 2.1-mm × 2-cm; 50-µm パッキング L1
分析値: 2.1-mm × 20-cm;パッキンL1
流量: 0.5 mL/分
注入サイズ: 20 μL
システム適合性
サンプル：標準液
適合性要件
相対標準偏差: オルリスタット関連化合物 E ピークの NMT 6.0%
分析
サンプル：標準液とサンプル液
採取されたオルリスタットの部分におけるこの不純物の割合を計算します。
結果 = (rU/rs) × (CS/CU) × 100
rU = サンプル溶液中のオルリスタット関連化合物 E のピーク応答
rS = 標準溶液中の USP オルリスタット関連化合物 E RS のピーク応答
CS = 標準溶液中の USP オルリスタット関連化合物 E RS の濃度 (mg/mL)
CU = サンプル溶液中のオルリスタットの濃度 (mg/mL)
合格基準
個別の不純物: NMT 0.2% のオルリスタット関連化合物 E が検出されます。
総不純物: NMT 総不純物の 1.0% が検出され、手順 1、2、3、4、および 5 の結果が追加されます。
特定のテスト
・旋光度、比旋光度<781>
サンプル溶液：30mg/mL無水アルコール溶液
合格基準: -48.0 ～ -51.0 (20 の場合)
• 水分測定、メソッド Ic<921>: NMT 0.2%
追加の要件
• 包装と保管: 密閉容器に入れて 2 ～ 8℃ で保管してください。
• USP 参照規格<11>
USP オルリスタット RS
USP オルリスタット関連化合物 A RS
USP オルリスタット関連化合物 B RS
USP オルリスタット関連化合物 C RS
USP オルリスタット関連化合物 D RS
USP オルリスタット関連化合物 E RS
USP35