硫酸ゲンタマイシン
[1405-41-0]
定義
Micromonospora purpurea によって生成される抗菌物質の硫酸塩の混合物。主成分はゲンタマイシン C1、C1a、C2、C2a、C2b です。
含有量: 最小 590 IU/mg (無水物質)。
登場人物
外観：白色またはほぼ白色の吸湿性粉末。
溶解度: 水に溶けやすく、エタノール (96 パーセント) にはほとんど溶けません。
識別
最初の識別: B、C.
2 番目の識別: A、C.
A. 薄層クロマトグラフィー(2.2.27)。
テスト溶液。検査対象物質 25 mg を水 R に溶解し、同じ溶媒で 5 mL に希釈します。
参考溶液。硫酸ゲンタマイシン CRS のバイアルの内容物を水 R に溶解し、同じ溶媒で 5 mL に希釈します。
プレート：TLCシリカゲルプレートR.
移動相: 等量の濃アンモニア R、メタノール R、および塩化メチレン R の混合物の下層。
適用: 10μL。
展開: プレートの 2/3 以上。
乾燥：空気中で。
検出: ニンヒドリン溶液 R1 をスプレーし、110℃で 5 分間加熱します。
結果: 試験溶液で得られたクロマトグラムの 3 つの主要スポットは、参照溶液で得られたクロマトグラムの 3 つの主要スポットと位置、色、サイズが類似しています。
B. 組成のテストで得られたクロマトグラムを検査します。
結果: 試験溶液 (b) で得られたクロマトグラムには、参照溶液 (a) で得られたクロマトグラムの 5 つの主ピークと同じ保持時間を持つ 5 つの主ピークが示されています。
C. 硫酸塩の反応 (a) が得られます (2.3.1)。
テスト
溶液 S。0.8 g を二酸化炭素-自由水 R に溶解し、同じ溶媒で 20 mL に希釈します。
溶液の外観。溶液 S は透明で (2.2.1)、最も適切な色の参照溶液の範囲の強度 6 よりも強く着色されていません (2.2.2、方法 II)。
pH (2.2.3): 溶液 S の場合は 3.5 ～ 5.5。
比旋光度 (2.2.7): + 107 ～ + 121 (無水物質)。
2.5 g を水 R に溶解し、同じ溶媒で 25.0 mL に希釈します。
構成。液体クロマトグラフィー (2.2.29): ゲンタマイシン C1、C1a、C2、C2a、および C2b によるピークのみを考慮した正規化手順を使用します。
テスト溶液 (a)。検査対象物質 25.0 mg を移動相に溶解し、移動相で 25.0 mL に希釈します。
テスト溶液（b）。 5.0 mL の試験溶液 (a) を移動相で 25.0 mL に希釈します。
参照溶液 (a)。ピーク同定用のゲンタマイシン CRS (不純物 B を含む) 5 mg を移動相に溶解し、移動相で 25 mL に希釈します。
参照溶液（b）。 20.0 mg の硫酸シソマイシン CRS (不純物 A) を移動相に溶解し、移動相で 20.0 mL に希釈します。
参照溶液（c）。 1.0 mL の参照溶液 (b) を移動相で 100.0 mL に希釈します。
参照溶液（d）。 1 mL の参照溶液 (b) に 5 mL の試験溶液 (a) を加え、移動相で 50 mL に希釈します。
コラム:
-サイズ: l = 0.25 m、Ø = 4.6 mm。
-固定相: クロマトグラフィー用オクタデシルシリルシリカゲル R (5 μm);
-気温：35℃。
移動相。 900 mL の二酸化炭素-遊離水 R に、7.0 mL のトリフルオロ酢酸 R、250.0 μL のペンタフルオロプロパン酸 R および 4.0 mL の炭酸-遊離水を加えます。
水酸化ナトリウム溶液 R を 1 ～ 25 に希釈した炭酸塩-遊離水酸化ナトリウム溶液 R を使用して平衡化し、pH 2.6 に調整します。15 mL のアセトニトリル R を加えて 2.6 に希釈します。
1000.0 mL、二酸化炭素-自由水 R.
流量: 1.0 mL/分。
ポスト-カラム溶液: 1～25に希釈し、事前に脱気した炭酸塩-遊離水酸化ナトリウム溶液Rを、375μLポリマー混合コイルを使用してカラム流出液にパルス状に添加する。
ポストカラム溶液の流速：０．３ｍＬ／分。