シタラビン
C9H13N3O5 243.22
2(1H)-ピリミジノン、4-アミノ-1--d-アラビノフラノシル-。
1--d-アラビノフラノシルシトシン [147-94-4]。
» シタラビンには、乾燥ベースで計算して、98.0 パーセント以上 102.0 パーセント以下の C9H13N3O5 が含まれています。
梱包と保管-密閉した耐光性の容器に保存してください。
ラベル表示-注射可能な剤形の調製に使用することが意図されている場合、ラベルには、滅菌されているか、注射可能な剤形の調製中にさらなる処理を受けなければならないことが記載されています。
USP 参照規格<11>-
USP シタラビン RS
USP エンドトキシン RS
USP ウラシルアラビノシド RS
識別-
Ａ：赤外線吸収率＜１９７Ｍ＞：水銀柱５ｍｍ以下の圧力で６０℃、３時間予め乾燥させた。
B: アッセイ調製物のクロマトグラムの主要ピークの保持時間は、アッセイで得られた標準調製物のクロマトグラムの保持時間に対応します。
比回転<781S>: +154 ～ +160。
試験溶液: 10 mg/mL、水中。
乾燥減量<731>-真空中で水銀柱 5 mm 以下の圧力、60℃で 3 時間乾燥させます。重量の減少は 1.0% を超えません。
強熱時残留物＜２８１＞：０．５％以下。
重金属、方法 II<231>: 0.001%。
クロマトグラフィー純度-
リン酸緩衝液-適切な容器に 0.01 M リン酸一水素ナトリウムと 0.01 M リン酸二ナトリウムを含む溶液を調製します。 0.1 M 水酸化ナトリウムまたは 0.1 M リン酸を使用して pH 7.0 に調整します。
ソリューション A-濾過し、脱気したリン酸緩衝液とメタノールの混合物 (49:1) を準備します。必要に応じて調整を行います (「クロマトグラフィー<621>」の「システム適合性」を参照)。この溶液は毎日新鮮に調製してください。
ソリューション B-濾過し、脱気したリン酸緩衝液とメタノールの混合物 (7:3) を準備します。必要に応じて調整を行います (「クロマトグラフィー<621>」の「システム適合性」を参照)。この溶液は毎日新鮮に調製してください。
移動相-クロマトグラフィー システムの指示に従って、溶液 A と溶液 B のさまざまな混合物を使用します。
システム適合性ソリューション-適切な量​​のウリジン、USP ウラシル アラビノシド RS、および USP シタラビン RS を水に溶解し、それぞれ 1 mL あたり約 0.02、0.02、および 5.0 mg を含む溶液を取得します。
標準溶液-正確に秤量した USP シタラビン RS を水に溶解し、定量的に、必要に応じて段階的に水で希釈して、1 mL あたり約 4 μg の既知濃度の溶液を取得します。
試験溶液-正確に秤量した約 25 mg のシタラビンを 5.0 mL メスフラスコに移し、水に溶解して定容まで希釈し、混合します。 [注-この溶液は毎日新鮮に調製してください。]
クロマトグラフィー システム (クロマトグラフィー<621> を参照)-液体クロマトグラフには、254-nm 検出器および充填物 L1 を含む 4.6-mm × 25-cm のカラムが装備されています。流量は毎分約 1 mL です。クロマトグラフは、溶液 A と溶液 B の可変混合物を提供するようにプログラムされており、注入時の溶液 B の割合は 0% です。この組成物を１０分間保持する。次に、溶液 B を 10 分間かけて 100% まで直線的に増加させます。この組成物を５分間維持した後、溶液Ｂの割合を５分間かけて０％まで直線的に減少させる。この組成を 20 分間維持して系を平衡化します。システム適合性ソリューションのクロマトグラフを作成し、手順に従ってピーク応答を記録します。相対保持時間は、ウラシルで約 0.55、ウリジンで 1.14、ウラシル アラビノシドで 1.62、シタラビンで 1.0 です。シタラビンとウリジン間の分解能 R は 1.25 以上です。標準溶液をクロマトグラフし、手順に従ってピーク応答を記録します。反復注入の相対標準偏差は 3.0% 以下です。
手順-等量（約 20 µL）の標準溶液と試験溶液をクロマトグラフに注入し、クロマトグラムを記録し、ピーク応答を測定します。シタラビンの一部に占めるウラシル アラビノシドの割合を次の式で計算します。
500(C/W)(ri/1.34rS)
ここで、C は標準溶液中の USP シタラビン RS の濃度 (mg/mL) です。 W は標本の重量 (mg)、1.34 はウラシル アラビノシドの相対応答係数です。 ri は、試験溶液中のウラシル アラビノシドのピーク応答です。 rS は標準溶液中の USP シタラビン RS のピーク応答です。検出されるのは 0.30% 以下です。
シタラビンの一部に含まれる他のすべての不純物の割合を次の式で計算します。
500(C/W)(ri/FrS)
ここで、C は標準溶液中の USP シタラビン RS の濃度 (mg/mL) です。 W は試験片の重量 (mg) です。 ri は、試験溶液中の各不純物のピーク応答です。 rS は、標準溶液中の USP シタラビン RS のピーク応答です。相対応答係数 F は、相対保持時間が 0.55 のウラシル ピークでは 2.5、相対保持時間が 0.38、0.43、および 1.14 のピークでは 1.5、その他すべてのピークでは 1.0 に等しくなります。個々の不純物は 0.10% 以下、不純物全体の 0.30% 以下 (ウラシル アラビノシドを含む) は検出されません。
その他の要件-ラベルにシタラビンが無菌であると記載されている場合、それは無菌試験 71 および注射用シタラビンの細菌内毒素の要件を満たしています。注射用剤形の調製中にシタラビンをさらに処理する必要があるとラベルに記載されている場合、それは注射用シタラビンの細菌エンドトキシンの要件を満たしています。
アッセイ-
リン酸緩衝液-第二リン酸ナトリウム 0.73 g と第二リン酸ナトリウム 1.4 g を水 1 L に溶解し、混合し、ろ過します。
移動相-濾過し、脱気したリン酸緩衝液とメタノールの混合物 (95:5) を準備します。必要に応じて調整を行います (「クロマトグラフィー<621>」の「システム適合性」を参照)。
標準的な準備-正確に秤量した USP シタラビン RS を水に溶解し、必要に応じて水で定量的に、段階的に希釈して、1 mL あたり約 0.1 mg の既知濃度を有する溶液を取得します。
解決策-正確に秤量した量の USP ウラシル アラビノシド RS を標準調製物に溶解し、必要に応じて標準調製物で定量的に、段階的に希釈して、1 mL あたり約 0.1 mg の既知濃度を有する溶液を取得します。
アッセイの準備-正確に秤量した約 10 mg のシタラビンを 100 mL メスフラスコに移し、水に溶解して定容まで希釈し、混合します。
クロマトグラフィー システム (クロマトグラフィー<621> を参照)-液体クロマトグラフには、254-nm 検出器および充填物 L1 を含む 4.6-mm × 25-cm のカラムが装備されています。流量は毎分約 1.0 mL です。分解溶液をクロマトグラフし、手順の指示に従ってピーク応答を記録します。相対保持時間は、シタラビンで約 1.0、ウラシル アラビノシドで 1.3 です。シタラビンとウラシル アラビノシド間の分解能 R は 2.5 以上です。標準調製物をクロマトグラフし、手順の指示に従ってピーク応答を記録します。反復注入の相対標準偏差は 2.0% 以下です。 [注-クロマトグラフィーが完了したら、水とメタノール (7:3) の混合物でカラムをフラッシュします。
手順-等量（約 10 µL）の標準調製物とアッセイ調製物をクロマトグラフに別々に注入し、クロマトグラムを記録し、主要ピークの応答を測定します。次の式でシタラビンの一部に含まれる C9H13N3O5 の量を mg 単位で計算します。
100℃(rU / rS)
ここで、C は標準製剤中の USP シタラビン RS の濃度 (mg/mL) です。 rU と rS は、それぞれアッセイ調製物と標準調製物から得られたピーク応答です。