シラスタチンナトリウム
C16H25N2NaO5S 380.44
2-ヘプテン酸、7-[(2-アミノ-2-カルボキシエチル)チオ]-2-[[(2,2-ジメチルシクロプロピル)カルボニル]アミノ]-、一ナトリウム塩、[R-[R*,S*-(Z)]]-。
ナトリウム (Z)-7-[[(R)-2-アミノ-2-カルボキシエチル]チオ]-2-[(S)-2,2-ジメチルシクロプロパンカルボキサミド]-2-ヘプテン酸 [81129-83-1]。
» シラスタチンナトリウムは、無水および無溶媒ベースで計算して、98.0パーセント以上、101.5パーセント以下のC16H25N2NaO5Sを含有する。
梱包と保管-注射 1 に記載されているように、滅菌固体用の容器に保存し、冷所に保管します。
ラベル表示-注射可能な剤形の調製に使用することが意図されている場合、ラベルには無菌であることが記載されています。
USP 参照規格<11>-
USP シラスタチン アンモニウム塩 RS
USP エンドトキシン RS
識別-
A: クロマトグラフィー純度の試験で得られた、試験溶液のクロマトグラムにおけるシラスタチンの主要ピークの保持時間は、USP シラスタチン アンモニウム塩 RS の同様の調製物のクロマトグラムにおける保持時間に対応します。
B: 少量を白金線の上で非発光炎で点火すると、炎が濃い黄色になります。
比回転＜７８１Ｓ＞：無水および無溶媒ベースで＋４１．５から＋４４．５の間。
試験溶液: 10 mg/mL、メタノールと塩酸の混合物 (120:1)。
細菌エンドトキシン<85>-ラベルにシラスタチンナトリウムが無菌であると記載されている場合、シラスタチン 1 mg あたり含まれる USP エンドトキシン単位は 0.17 以下です。
無菌<71>-ラベルにシラスタチンナトリウムが無菌であると記載されている場合、試験対象製品の無菌性試験の膜濾過の指示に従って試験した場合、200 mL の液体 A に溶解した 6 g の検体を使用して要件を満たします。
pH<791>:溶液中(1/100)で6.5〜7.5。
水、方法 I<921>: 2.0% 以下。
重金属、方法 II<231>: 0.002%。
溶媒の限界-
内部標準液- 0.5 mLのn-プロピルアルコールを1000 mLのメスフラスコに移し、水で定容まで希釈し、混合する。
標準溶液-アセトン 2.0 mL、メタノール 0.50 mL、酸化メシチル 0.50 mL を 1000 mL メスフラスコに移し、水で定容まで希釈し、混合します。この溶液 2.0 mL と内部標準溶液 2.0 mL を 10 mL メスフラスコに移し、水で定容し、混合します。この溶液には、1 mL あたりアセトン 316 μg、メタノール 79 μg、酸化メシチル 86 μg が含まれています。
試験溶液-シラスタチンナトリウム約 200 mg を正確に量り、10 mL メスフラスコに移し、内標準液 2.0 mL と水約 5 mL を加えて振り混ぜて溶解します。水で適量に希釈し、混合します。
クロマトグラフィーシステム (クロマトグラフィー<621> を参照) - ガスクロマトグラフには、イオン化検出器と、内壁が液相 G16 の 1.0-μm フィルムでコーティングされた 0.53-mm × 30-m のキャピラリーカラムが装備されています。カラム温度を 50℃で 2.5 分間維持し、その後 1 分あたり 8 の速度で 70℃まで上昇させ、70℃で 0.5 分間維持します。注入口の温度は 160 ℃に維持されます。検出器の温度は 250 ℃に維持されます。ヘリウムは、毎分約 9 mL の流量でキャリアガスとして使用されます。標準溶液をクロマトグラフし、手順の指示に従ってピーク応答を記録します。相対保持時間は、アセトンでは約 0.26、メタノールでは 0.35、n-プロピル アルコールでは 0.67、酸化メシチルでは 1.0 です。そして、n-プロピルアルコールに対する各分析物のピーク面積比から決定される反復注入の相対標準偏差は、5.0%以下です。
手順-溶媒（水）フラッシュ技術を使用して、等量（約 1 μL）の標準溶液と試験溶液をクロマトグラフに別々に注入します。クロマトグラムを記録します。アセトン、メタノール、n-プロピルアルコール、およびメシチルオキシドのピークの面積を測定します。シラスタチンナトリウム部分に占めるアセトン、メタノール、酸化メシチルの割合を次の式で計算します。
(C/W)(RU/RS)
ここで、C は標準溶液中の適切な分析物の濃度 (μg/mL) です。 Wは、試験溶液を調製するために採取されたシラスタチンナトリウムの量（mg）です。 RUおよびRSは、それぞれ試験溶液および標準溶液から得られたn-プロピルアルコールに対する対応する分析物のピーク面積比です。アセトンは 1.0% 以下しか検出されません。メタノールは 0.5% 以下しか検出されません。酸化メシチルは0.4%以下しか検出されません。
クロマトグラフィー純度-
溶剤-水を使用してください。
ソリューション A-希リン酸 (1/1000) とアセトニトリル (700:300) の混合物を調製し、0.5μm 以下の多孔度のフィルターに通し、脱気します。
ソリューション B-希リン酸 (1/1000) を使用してください。 0.5μm以上の微細孔を有するフィルターを通し、脱気する。
移動相-クロマトグラフィー システムの指示に従って、溶液 A と溶液 B のさまざまな混合物を使用します。必要に応じて調整を行います (「クロマトグラフィー<621>」の「システム適合性」を参照)。
試験溶液- １ｍＬ当たり約１．６ｍｇの濃度を有するシラスタチンナトリウムの溶媒溶液を調製する。
クロマトグラフシステム (クロマトグラフィー<621> を参照)-液体クロマトグラフには、210-nm 検出器および充填物 L1 を含む 4.5-mm × 25-cm カラムが装備されています。カラムは約 50℃の一定温度に維持されます。流量は毎分約 2 mL です。クロマトグラフは次のようにプログラムされています。
時間
(分) ソリューション A
(%) 溶液 B
(%) 溶出
0 15 85 平衡
0-30 15®100 85®0 線形勾配 試験溶液をクロマトグラフし、手順の指示に従ってピーク応答を測定します。容量係数 k¢ は 10 以上です。シラスタチンのピークから決定されるカラム効率は理論段数 3000 段以上です。テーリングファクターは 4.5 以下です。
手順-等量（約 20 μL）の試験溶液と溶媒を別々にクロマトグラフに注入し、クロマトグラムを記録し、ピークの面積を測定します。次の式により、シラスタチン ナトリウム部分のクロマトグラフィー純度をパーセンテージで計算します。
100rC / (rT rB rA)
ここで、rC は試験溶液から得られたシラスタチンのピークの面積です。 rT は、試験溶液から得られたすべてのピークの面積の合計です。 rB は、溶媒から得られたすべてのピークの面積の合計です。 ｒＡは、試験溶液から得られる溶媒フロントにおけるアセトンなどの非保持物質のピーク（存在する場合）の応答である：９８．５％以上が見出される。シラスタチン ナトリウムの部分に含まれる各不純物の割合を次の式で計算します。
100ri / (rT rB rA)
ここで、ri は試験溶液から得られたクロマトグラムにおける各不純物のピーク面積であり、他の項は上記で定義したとおりです。個々の不純物は 0.5% 以下しか検出されません。
アッセイ-正確に秤量した約 300 mg のシラスタチン ナトリウムを適切なビーカーに移し、30 mL のメタノールを加え、かき混ぜて溶解します。 5 mL の水を加え、0.1 N 塩酸で電位差滴定して pH 約 3 にします。次に、3 つの変曲点が観察されるまで 0.1 N 水酸化ナトリウムで滴定します。最初の変曲点と 3 番目の変曲点の間の力価の差を mL で計算します。 0.1 N 水酸化ナトリウム 1 mL は、19.022 mg の C16H25N2NaO5S に相当します。