アミノサリチル酸
C7H7NO3 153.14
安息香酸、4-アミノ-2-ヒドロキシ-。
4-アミノサリチル酸[65-49-6]。
» アミノサリチル酸には、無水ベースで計算して、98.5 パーセント以上 100.5 パーセント以下の C7H7NO3 が含まれています。
[注意-アミノサリチル酸から調製した溶液の色が、新たに調製した溶液の色より濃い場合は、いかなる場合でも使用しないでください。
梱包と保管-密閉した耐光性の容器に入れ、30度を超えない温度で保存してください。
USP 参照規格<11>-
USP アミノサリチル酸標準品
USP m-アミノフェノール RS
溶液の透明度と色- 1 g を 10 mL の重炭酸ナトリウム溶液 (15 分の 1) に溶解すると、かすかな黄色以下の透明な溶液が形成されます。 1 g を硝酸 5 mL と水 45 mL の新たに調製した混合物に溶解すると、わずかな色しかない透明な溶液が形成されます。
識別-
Ａ：０．２５ｇを３ｍＬの１Ｎ水酸化ナトリウムに溶解し、５００ｍＬのメスフラスコに移し、水で定容し、混合する。 5-mL のアリコートを、12.5 mL の pH 7 リン酸緩衝液 (セクション「試薬、指示薬、および溶液」の緩衝液を参照) が入っている 250-mL メスフラスコに移し、水で定容まで希釈し、混合します。この溶液は、適切な分光光度計で同じ濃度の同じ緩衝液のブランクと比較すると、265 ± 2 および 299 ± 2 nm で最大吸光度を示し、A265/A299 比は 1.50 ～ 1.56 です。
Ｂ：小さなナスフラスコに約１ｇを入れ、無水酢酸１０ｍＬを加える。フラスコをスチームバス上で 30 分間加熱し、水 40 mL を加え、混合し、濾過し、冷却し、ジアセチル誘導体が結晶化するまで放置します。フィルター上で沈殿を収集し、水でよく洗浄し、１０５℃で１時間乾燥させる。こうして得られたジアセチル誘導体は１９１℃と１９７℃の間で融解する。
C: 0.1 g を 10 mL の水とともに振り、濾過します。濾液 5 mL に塩化第二鉄 TS を 1 滴加えると、紫色が生じます。
pH<791>: 飽和溶液中、3.0〜3.7。
水、方法 I<921>: 0.5% 以下。
強熱残留物＜２８１＞：０．２％以下。
塩化物<221>- 0.50 g を硝酸 5 mL と水 15 mL の混合物に溶解します。この溶液は、0.020 N 塩酸 (0.042%) 0.30 mL に相当する以上の塩化物を示しません。
重金属、メソッド II 231: 0.003%。
m-アミノフェノール-の限界
移動相-アッセイの指示に従って準備します。
内部標準液-移動相で 1 mL あたり約 5 μg の濃度のスルファニルアミド溶液を調製します。
標準溶液-正確に秤量した量の USP m-アミノフェノール RS を移動相に溶解し、1 mL あたり約 12 μg の既知の濃度を有する溶液を取得します。この溶液 10.0 mL と内部標準溶液 10.0 mL を 100 mL 低活性メスフラスコに移し、移動相で定容し、混合する。
試験溶液-正確に秤量した約50 mgのアミノサリチル酸を100 mLの低活性メスフラスコに移し、50 mLの移動相を加え、かき混ぜて溶解します。内部標準溶液 10.0 mL を加え、移動相で定容し、混合します。
クロマトグラフィー システム (クロマトグラフィー<621> を参照)-液体クロマトグラフには、280-nm 検出器および 10-µm の充填物 L1 を含む 4.6-mm × 25-cm のカラムが装備されています。流量は毎分約 1.5 mL です。標準溶液をクロマトグラフし、手順の指示に従ってピーク応答を記録します。相対保持時間は、スルファニルアミドの場合は約 0.66、アミノフェノールの場合は 1.0 です。アミノフェノールとスルファニルアミド間の分離度 R は 2.5 以上です。反復注入の相対標準偏差は 7% 以下です。
手順- [注意-使用後、カラムを濾過し脱気したメタノール、水、およびリン酸の混合物 (77:23:0.6) で 30 分間洗浄し、次に濾過し脱気したメタノールと水 (50:50) の混合物で 30 分間洗浄します。 ] 等量（約 20 μL）の標準溶液と試験溶液をクロマトグラフに別々に注入し、クロマトグラムを記録し、主要ピークの応答を測定します。アミノサリチル酸部分中のアミノサリチル酸の量に対するアミノフェノールの割合を次の式で計算します。
10(C/W)(RU/RS)
ここで、C は標準溶液中の USP m-アミノフェノール RS の濃度 (μg/mL)、W はアッセイで測定したアミノサリチル酸の摂取部分中のアミノサリチル酸の量 (mg) です。 RUおよびRSは、試験溶液および標準溶液から得られたスルファニルアミドのピークの応答に対するアミノフェノールのピークの応答の比である。それぞれ: 0.25% 以下のアミノフェノールが検出されます。
硫化水素、二酸化硫黄、アミルアルコール-約 500 mg を 1 N 水酸化ナトリウム 5 mL に溶解し、3 N 塩酸 6 mL を加え、激しく撹拌します。硫化水素または二酸化硫黄の臭気は感じられず、アミルアルコールのかすかな臭気しか感じられません。湿らせた酢酸鉛試験紙を混合物の上にかざしても変色しません。
アッセイ-
移動相- 0.05 M 二塩基性リン酸ナトリウム 425 mL、0.05 M リン酸二水素ナトリウム 425 mL、および水酸化テトラブチルアンモニウム 1.9 g を含むメタノール 150 mL の混合物を調製します。濾過し、脱気します。必要に応じて調整を行ってください (「クロマトグラフィー 621」の「システム適合性」を参照)。
内部標準液-移動相で 1 mL あたり約 5 mg の濃度のアセトアミノフェンの溶液を調製します。
標準的な準備-正確に秤量した約 12.5 mg の USP アミノサリチル酸 RS を 25 mL の低活性メスフラスコに移し、15 mL の移動相を加え、かき混ぜて溶解します。 2.5 mL の内部標準溶液を加え、移動相で所定の容量まで希釈し、混合します。
アッセイの準備- USP アミノサリチル酸 RS の代わりにアミノサリチル酸を使用することを除いて、標準調製の指示に従って調製します。
クロマトグラフィー システム (クロマトグラフィー<621> を参照)-クロマトグラフには、254-nm 検出器および充填物 L1 を含む 4.6-mm × 25-cm カラムが装備されています。流量は毎分約 1.5 mL です。標準調製物をクロマトグラフし、手順の指示に従ってピーク応答を記録します。相対保持時間は、アセトアミノフェンで約 0.83、アミノサリチル酸で 1.0 です。アミノサリチル酸とアセトアミノフェンの間の分離度 R は 1.7 以上です。アセトアミノフェンのピークの応答に対するアミノサリチル酸のピークの応答の比の相対標準偏差は１．０％以下である。
手順- [注-使用後、カラムを濾過し脱気したメタノール、水、およびリン酸の混合物 (77:23:0.6) で 30 分間洗浄し、次に濾過し脱気したメタノールと水の混合物 (50:50) で 30 分間洗浄します。] 等量 (約 20 μL) の標準調製物とアッセイ調製物を別々にクロマトグラフに注入し、クロマトグラムを記録します。そして、主要なピークの応答を測定します。次の式でアミノサリチル酸中の C7H7NO3 の量を mg 単位で計算します。
25℃(RU/RS)
ここで、C は標準調製物中の USP アミノサリチル酸 RS の濃度 (mg/mL) です。 ＲＵおよびＲＳは、それぞれアッセイ調製物および標準調製物から得られたアセトアミノフェンピークの応答に対するアミノサリチル酸ピークの応答の比である。